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大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書
發(fā)布時(shí)間:2025/6/12瀏覽:60次
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  大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書

  以下是關(guān)于大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說明綜合整理:

  BS-2953  大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒

  一、檢測(cè)原理

  采用雙抗體夾心ELISA法:包被抗大鼠OxLDL抗體的微孔板中依次加入樣本和標(biāo)準(zhǔn)品,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,TMB顯色后顏色深淺與OxLDL濃度成正比。

  二、試劑盒組成

  主要組分?

  預(yù)包被酶標(biāo)板(96孔或48孔)

  標(biāo)準(zhǔn)品(凍干粉或液體,含不同濃度梯度)

  酶標(biāo)抗體工作液(HRP標(biāo)記)

  顯色液(TMB A/B液)

  終止液(硫酸溶液)

  濃縮洗滌液(20×或30×)

  保存條件?

  未開封試劑盒需2-8℃保存,部分組分(如標(biāo)準(zhǔn)品)需-20℃凍存;開封后酶標(biāo)板應(yīng)密封防潮。

  三、樣本處理

  樣本類型?:血清、血漿(EDTA/肝素抗凝)、組織勻漿或細(xì)胞上清液。

  處理方法?:

  血清/血漿:3000轉(zhuǎn)/分離心10-20分鐘去除顆粒物。

  組織勻漿:生理鹽水勻漿后離心取上清。

  稀釋要求:部分試劑盒需用配套稀釋液按1:1或1:2預(yù)稀釋。

  四、實(shí)驗(yàn)步驟

  標(biāo)準(zhǔn)品配制?:凍干標(biāo)準(zhǔn)品需用稀釋液復(fù)溶,梯度稀釋為5-7個(gè)濃度(如5ng/ml至75ng/ml)。

  加樣與孵育?:

  每孔加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,37℃孵育1小時(shí)。

  洗滌3次后加入酶標(biāo)抗體,再次孵育30分鐘。

  顯色與終止?:

  加入TMB顯色液避光反應(yīng)10分鐘,后加終止液變黃色。

  檢測(cè)?:450nm波長測(cè)定OD值,空白孔調(diào)零。

  五、結(jié)果計(jì)算

  以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,樣本濃度通過曲線方程計(jì)算后乘以稀釋倍數(shù)。

  注意:高濃度樣本可能需二次稀釋以保證線性范圍。

  六、注意事項(xiàng)

  避免反復(fù)凍融樣本,解凍后需混勻。

  洗滌需,防止非特異性結(jié)合。

  顯色時(shí)間需嚴(yán)格控制,避免過度反應(yīng)。

  不同批次試劑盒組分不可混用。

  七、局限性

  濃度樣本(超過標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍)需稀釋后重測(cè)。

  注:以上資料僅供參考,僅限科研使用,不可用于臨床診斷。

  如需具體操作細(xì)節(jié),建議參考對(duì)應(yīng)試劑盒說明書(如48孔/96孔配置可能步驟略有差異)。

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