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如何判斷低吸附培養(yǎng)板是否失效?
更新時間:2026-01-04瀏覽:330次

  如何判斷低吸附培養(yǎng)板是否失效?

  顯微鏡觀察法

  低吸附培養(yǎng)板失效時,細胞會異常貼壁或形成團塊。鏡下觀察:

  正常狀態(tài)?:細胞懸浮生長,呈均勻分散的球狀或聚集體?。

  失效表現(xiàn)?:細胞貼壁生長(如呈鋪路石狀)或出現(xiàn)大量死細胞碎片?。

  臺盼藍染色法

  操作?:取細胞懸液與臺盼藍染液1:1混合,3分鐘內(nèi)鏡檢。

  結(jié)果?:活細胞(膜完整)無色,死細胞(膜破損)染藍?。若活細胞率<80%,可能提示培養(yǎng)板表面吸附性異常。


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  培養(yǎng)液狀態(tài)

  正常?:培養(yǎng)液清亮,無渾濁或沉淀?。

  異常?:培養(yǎng)液變黃、渾濁或出現(xiàn)絮狀物,可能因細胞代謝異常或污染導(dǎo)致?。

  細胞活性檢測

  MTT法?:活細胞代謝還原紫色結(jié)晶,吸光度值高;失效時吸光度顯著下降。

  熒光染色?:Calcein-AM標記活細胞(綠色),PI標記死細胞(紅色)。若死細胞比例驟增,需懷疑培養(yǎng)板問題。

  綜合判斷?:若顯微鏡下細胞貼壁、臺盼藍死細胞率>20%、培養(yǎng)液渾濁且MTT吸光度低,則培養(yǎng)板很可能失效。

  注:供科研使用,以上資料供參考。

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