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PCR黏性光學封板膜用途及使用方法
關于“PCR黏性光學封板膜",這是一種專門為實時熒光定量PCR(qPCR)實驗設計的關鍵耗材。下面本生將為您詳細解釋其特點、用途和使用方法。
一、 核心功能與特點
顧名思義,這種封板膜結合了三大核心功能:
光學特性
高透光率:膜體本身由高度透明的聚合物(如聚丙烯或特種復合薄膜)制成,確保在實時熒光定量PCR(qPCR)過程中,光學檢測系統能夠高效、準確地采集熒光信號,不會因膜材的遮擋或自身熒光而干擾實驗結果。
低自發熒光:這是最關鍵的特性。高質量的光學膜經過特殊處理,其自身產生的背景熒光(本底熒光)極低,可減少噪音,提高信噪比,保證數據的精確性和靈敏度。
黏性密封
強粘合劑層:膜的邊緣涂有生物相容性的壓敏膠。其作用是提供牢固的氣密性密封。
防止蒸發:在PCR的熱循環過程中(通常涉及95℃以上的高溫),反應體系中的液體會劇烈蒸發。黏性密封能有效防止蒸發和冷凝,避免反應體系體積和濃度的變化,這對于實驗的重復性和準確性至關重要。
避免污染:密封功能同時防止了樣本間的交叉污染以及外界污染物進入孔內。
封板形式
專為標準96孔板、384孔板或其他多孔板設計,可一次性密封整個板子,適用于高通量實驗。
二、 主要應用場景
實時熒光定量PCR
數字PCR
其他需要精確光學檢測且防止蒸發的微孔板實驗。
三、 使用方法(標準步驟)
準備:
完成PCR反應體系的配制,并將液體轉移至PCR多孔板中。
從包裝中取出封板膜,切勿用手直接觸摸膜的中央區域,以免手上的油脂、灰塵或核酸酶污染膜的光學面。應手持膜的邊緣。
檢查膜是否有破損或污染。
貼合:
將封板膜有粘性的一面對準PCR板,先從一端(例如長邊的一端)對齊并貼合。
然后用手指或壓板工具,從已貼合的一端緩緩向另一端推進,確保膜平整地、無氣泡地覆蓋在板子上。這個操作類似于給手機貼膜,目的是排除氣泡。
壓緊:
使用專用的板膜滾輪用力、均勻地滾壓整個封板膜表面,特別是每個孔之間的區域和板的四周邊緣,確保粘合緊密,形成有效密封。
重要:如果沒有滾輪,可以用手指用力按壓,但務必確保每個孔周圍都密封到位。密封不嚴是導致蒸發和交叉污染的常見原因。
上機運行:
將密封好的PCR板放入實時熒光定量PCR儀中進行熱循環反應。儀器的光學蓋會直接壓在封板膜上進行熒光掃描。
移除:
實驗結束后,從儀器中取出板子。通常從一角小心地揭開封板膜并丟棄。注意:反應后的板內可能含有擴增產物,是重要的污染源,操作時應戴手套,并將廢棄的板子和封板膜作為生物危險廢物處理。
總結
PCR黏性光學封板膜是為qPCR實驗“量身定做"的密封解決方案。 它地平衡了優異的光學透性和可靠的氣密密封性兩大核心需求,是確保q實驗結果準確、可靠的基礎保障。在選擇時,務必確認其適用于qPCR且具有低自發熒光的特性。
注:以上資料僅供參考,不作為實際數據,如需具體產品資料請咨詢技術老師或品牌商。
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